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细胞移植法建立的肿瘤模型的类型有哪些

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  • 2018-7-26 15:32
  • medicilon 发表于 2019-11-27 09:23:45 | 显示全部楼层 |阅读模式
    构建保持肿瘤生物学的肿瘤模型,来尽可能地模拟肿瘤患者的临床生理特征,是抗肿瘤药物研发的关键。自发、诱发、移植和转基因方法都是构建动物肿瘤模型的手段,其中移植瘤模型具有成功率高、生物学性状稳定、建立周期短,和基本能满足肿瘤的生物学行为研究及药物研发的需要等特点而被广泛应用。

    细胞移植模型是直接用肿瘤细胞接种动物制作的肿瘤动物模型,常见的接种方式有皮下成瘤、腹腔注射、静脉注射和原位荷瘤等。一些公司可以提供裸鼠成瘤、皮下瘤实验服务等来帮助客户进行医学上的研究。细胞移植法建立的肿瘤动物模型又可以分为非实体瘤细胞移植模型和实体瘤细胞移植模型。

    1、实体瘤细胞移植模型

    肿瘤有实体瘤和非实体瘤之分,实体瘤是指通过一些医学技术可以发现有形肿块的肿瘤,绝大多数的实体瘤可以通过手术切除来达到治疗乃至根治的效果。如结肠癌、肺癌等。如有研究者建立了稳定过表达IL-9的小鼠CT-26肿瘤细胞株及BALB/C小鼠皮下移植瘤模型,为后续研究IL-9在结肠癌肿瘤微环境中的作用及其机制提供实验基础[2]。一些公司提供的皮下瘤实验服务可以将肿瘤细胞或组织移植到小鼠体内,随着时间的推移该肿瘤细胞或组织在小鼠体内形成可见的肿瘤块,并以此为模型进行疾病发生机制和药物筛选的研究。

    研究者将目的基因IL-9片段插入带有绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体GV492,构建重组过表达IL-9-GV492质粒,转染293T细胞后,用倒置荧光显微镜观察GFP的表达强度,用蛋白免疫印迹法检测IL-9的表达;包装病毒后检测病毒滴度。将过表达IL-9的慢病毒转染小鼠结肠癌CT-26细胞后,用倒置荧光显微镜观察GFP的表达强度,用流式细胞仪检测GFP及IL-9的表达,用qRT-PCR法检测IL-9的mRNA表达。过表达IL-9的CT-26细胞皮下接种BALB/C小鼠建立皮下移植瘤模型后,用免疫组化法检测肿瘤中IL-9的蛋白表达,用qRT-PCR法检测IL-9的mRNA表达。结果发现稳定过表达IL-9的小鼠结肠癌CT-26细胞株及BALB/C小鼠皮下移植瘤模型建立成功。

    2、非实体瘤细胞移植模型

    非实体瘤的瘤细胞广泛分布在骨髓和血液中,如血液系统肿瘤。它不形成肿块,无法通过手术方式切除,可以通过化疗来治疗。分实体瘤的肿瘤细胞的分离通常是将白血病的血液样本、骨髓标本或者小鼠腹腔内培养传代的非实体瘤腹水标本添加等量的平衡盐溶液或生理盐水,充分混匀后进行离心分离的。如果是体外悬浮培养的传代的非实体瘤细胞,则是直接收获带肿瘤细胞的培养液进行离心获得肿瘤细胞。

    然后将收获到的肿瘤细胞用无血清培养液或平衡盐溶液调成(1*10^6~1*10^7)/ml的浓度,接种小鼠或者裸小鼠或者SCID小鼠腹腔或尾静脉,每只小鼠0.2~0.5ml。接种的量根据细胞的恶性程度不同有所加减。倘若小鼠腹腔接种后,可以抽取小鼠腹水分离肿瘤细胞,进一步皮下接种制作实体瘤转移模型。如有研究者将人早幼粒白血病细胞(HL-60)移植裸鼠皮下,形成了实体型移植瘤(HL-60X)。瘤株已传7代,成瘤率达100%。用该移植瘤模型初步观察到,多胺生物合成抑制剂二氟甲基乌氨酸(DFMO)、阿霉素、及两种药物联合使用,对肿瘤生长有抑制作用研究。

    通过细胞移植来建立移植瘤模型,可以为研究人类肿瘤的干预措施提供理想的动物模型,对于药物研发至关重要。美迪西根据客户的需求提供各种有效的异种肿瘤移植模型,用来检测药物的有效性。常规的肿瘤疾病有:头颈、肺癌、乳腺癌、胃癌、胰腺癌等,通过大小鼠、仓鼠等进行动物实验。

    [1] 稳定过表达IL-9的小鼠CT-26肿瘤细胞株及BALB/C小鼠皮下移植瘤模型的建立[J].


    临床药师网,伴你一起成长!微信公众号:clinphar2007

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    cry
    还木有人打赏~
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