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分享 盘点那些常用的融合标签
medicilon 2018-7-19 14:14
融合标签技术是 20 世纪末兴起的一种基因重组技术,其主要过程是利用重组 DNA 技术在靶蛋白编码基因的 3' 端或 5' 端融合某种标签的编码基因,通过适宜的宿主来表达重组蛋白质,表达的重组蛋白质可以通过融合的标签与包被在固相基质上的特异配基结合而进行纯化。因此该项技术也常被应用在一些医药研发外包服务公司 ...
个人分类: 蛋白表达与纯化|701 次阅读|0 个评论
分享 浅析影响毕赤酵母表达的环境因素
medicilon 2018-7-9 11:55
目前基因工程有四大表达系统 ,即 酵母表达 系统 、 杆状病毒载体表达 系统 、 大肠杆菌表 达 系 统、哺乳动物细胞表达系统,美迪西生物医药拥有这四种表达系统。毕赤酵母表达系统在表达外源蛋白方面具有独特的优势,是一种异源蛋白表达的理想系统。 外源基因在毕 ...
个人分类: 蛋白表达与纯化|568 次阅读|0 个评论
分享 酵母表达系统之酿酒酵母表达系统
medicilon 2018-7-4 15:55
随着分子生物学技术的发展,利用微生物表达系统生产外源基因产物已经成为可能。酵母是单细胞低等真核生物, 酵母表达系统 与昆虫表达系统、哺乳动物表达系统相比,兼具两者优点,同时酵母表达系统具有操作简单,成本低廉,可大规模进行发酵等特点,因此是最理想的重组真核蛋白质生产制备工具。美迪西生物医 ...
个人分类: 蛋白表达与纯化|475 次阅读|0 个评论
分享 利用昆虫细胞表达系统可表达肠道病毒
medicilon 2018-6-26 14:19
肠道病毒 71 型为手口足病主要病原体, VP1 是 EV71 的结构蛋白,且 EV71 主要的中和抗原决定簇集中于 VP1 上,因此研究 EV71 VP1 蛋白具有重要意义。有研究者利用 昆虫细胞表达系统 表达肠道病毒 71 型 VP1 蛋白并对其进行纯化,研究结果指出,利用昆虫杆状病毒表达系统成功表达 EV71 VP1 蛋白。 ...
个人分类: 蛋白表达与纯化|446 次阅读|0 个评论
分享 利用昆虫细胞表达系统可获得重组人CYP2C19蛋白
medicilon 2018-6-14 15:55
细胞色素 P450 作为最大的药物代谢酶系统,主要催化药物的Ⅰ相代谢 ( 氧化反应 ) ,其基因的 蛋白重组表达 及应用的研究上所得的数据可以对临床用药提供理论指导。 CYP2C19 是肝微粒体细胞色素 P450 的一种 , 昆虫细胞可以进行胞内和分泌表达,重组蛋白表达量高,而且更适宜表达多元蛋白复合物。利用 ...
个人分类: 蛋白表达与纯化|469 次阅读|0 个评论
分享 蛋白纯化过程中沉淀的形成影响因素
medicilon 2018-6-11 16:56
生物分子的分离纯化是获得有效生物产品的重要环节之一,在 重组蛋白 纯化 过程中需要考虑目的物性质,合理选择及组合具有各自特点及优势的层析技术,才能达到最优的纯化效果,满足目标产品产量、纯度等多方面的要求。蛋白的分离纯化及制备过程中,会产生沉淀,这些沉淀有可逆和不可逆 2 种。 ...
个人分类: 蛋白表达与纯化|392 次阅读|0 个评论
分享 盘点pET原核蛋白质表达研究常见的问题
medicilon 2018-6-11 13:55
将克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达,我国也有不少医药研发机构提 供 原核表达服务 。在各种表达系统中,最早被采用进行研究的是原核表达系统,这也是目前掌握最为成熟的表达系统。美迪西建立了成熟的大肠杆菌表达及纯化服务平台,提供包括各种重组蛋白以 ...
个人分类: 蛋白表达与纯化|353 次阅读|0 个评论
分享 药物靶点GPCR与疾病的关系
medicilon 2018-6-4 14:07
GPCR 作为最大的药物靶标蛋白家族, 一直是最重要的药物靶点 , 也是药理学研究的重要内容,与人类疾病关系密切。 GPCR 的主体由 7 段跨细胞质膜的α螺旋结构构成,构象很不稳定,具有 “ 活泼好动 ” 的个性,因此其 蛋白 表达纯化 和结晶都非常困难。蛋白表达是指用模式生物如细菌、酵母、动物细胞或 ...
个人分类: 蛋白表达与纯化|675 次阅读|0 个评论
分享 在大肠杆菌中表达重组蛋白的常见问题与解决办法
medicilon 2018-5-30 09:05
大肠杆菌表达系统是目前 重组蛋白表达 与纯化 最常用系统,其拥有众多不同类型的载体和受体菌株,已被发展成为一种安全的基因工程实验体系。虽然该系统具有遗传背景清晰、生长迅速、培养方便、表达量高等诸多优点,但是依然存在容易形成包含体、缺乏翻译后修饰系统、密码子偏爱性和膜蛋白表达困难等 ...
个人分类: 蛋白表达与纯化|1061 次阅读|0 个评论 热度 1
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