TA的每日心情 | 2018-7-26 15:32 |
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蒽醌类化合物是芦荟的重要活性成分之一,主要包括芦荟大黄素、大黄酚、大黄素、大黄酸和大黄素甲醚等。大量的细胞实验表明,蒽醌类化合物芦荟大黄素可以通过阻滞细胞周期抑制肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞凋亡的作用。因此对于芦荟大黄素类抗肿瘤药物的研发备受医药研发人员的关注,一些生物公司提供细胞实验服务。
有研究者通过细胞实验研究了芦荟大黄素对子宫内膜癌细胞的作用,还有研究者探讨了芦荟大黄素对人肝癌HepG2细胞端粒酶活性的影响及机制,研究者采用端粒重复序列扩增技术(TRAP)进行HepG2细胞端粒酶活性检测,发现芦荟大黄素可通过下调cmyc和hTERT表达从而抑制HepG2细胞端粒酶活性。美迪西的生物部在体外生物学领域有丰富广泛的经验,通过酶水平测定、细胞水平测定、细胞生物学、生物化学、体外同位素测定、稳定细胞株建立、基因敲除、RNAi和MicroRNA技术等,提供一套完整的生物学服务。
1、芦荟大黄素对人子宫内膜癌细胞的作用
研究者探讨了芦荟大黄素对人子宫内膜癌细胞HEC-1-B迁移和侵袭的影响[1]。方法是HEC-1-B细胞培养后分对照组及实验组,对照组细胞不进行任何处理,实验组用芦荟大黄素(30μmol/L)作用24h。应用细胞划痕实验测芦荟大黄素对HEC-1-B细胞迁移的影响;应用Transwell小室实验检测芦荟大黄素对HEC-1-B细胞侵袭的影响。结果与对照组相比,实验组24h后划痕宽度明显大于对照组的划痕宽度。实验组24h后的透膜细胞数明显减少。因此芦荟大黄素可抑制人子宫内膜癌细胞的迁移与侵袭。细胞划痕实验是是一项常规的细胞实验服务,作为一种简单易行的检测细胞运动的方法,实验成本低,可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。
还有研究者进行了芦荟大黄素(AE)通过Notch信号通路对子宫内膜癌(EC)细胞增殖、凋亡的影响及对患者预后意义研究[2]。研究者购买子宫内膜癌细胞系RL-952,利用细胞增殖、凋亡实验,研究AE对RL-952的影响;利用细胞迁移和侵袭实验,研究AE对EC患者预后的影响;利用WB、qRT-PCR研究AE对肿瘤细胞内Notch信号通路相关蛋白表达情况的影响。结果发现AE抑制细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡;AE增加Notch1、Notch3mRNA和蛋白的表达,抑制Jagged1、DLL4mRNA和蛋白的表达水平,使Notch信号通路被激活。因此AE通过激活Notch信号通路,抑制EC肿瘤细胞的增殖、诱导细胞凋亡,并抑制细胞迁移和侵袭,上述结果为改善EC患者的治疗提供相关理论依据。
2、芦荟大黄素对人肝癌细胞端粒酶活性的影响
人们发现,永生细胞和肿瘤细胞能够长期生存,端粒酶起到了重要的作用。端粒酶与细胞的增生、分化和不死性有着极为密切的关系,已成为目前肿瘤和衰老基础研究的热点之一。有研究者观察芦荟大黄素(AE)对人肝癌HepG2细胞端粒酶活性的影响,并探讨其可能的分子机制[3]。方法取对数生长期的HepG2细胞,分别以终浓度为0、10、30、50μmol/L的AE作用24h;收集HepG2细胞,采用端粒重复序列扩增技术(TRAP)测定HepG2细胞端粒酶活性,分别以Western blotting、PCR法检测HepG2细胞中的hTERT、c-myc蛋白和基因表达水平。
结果以终浓度为0、10、30、50μmol/L的AE作用HepG2细胞24h,其端粒酶活性分别为0.707±0.001、0.546±0.008、0.338±0.001、0.214±0.009;随着AE浓度升高,HepG2细胞的端粒酶活性下降,且30、50μmol/L与0μmol/LAE作用的HepG2细胞端粒酶活性差异有统计学意义(P均<0.05)。随着AE浓度升高,HepG2细胞hTERT、c-mycmRNA和蛋白表达水平均下降;其中,hTERT、c-mycmRNA和蛋白在50μmol/L,hTERTmRNA在30μmol/L,与0μmol/L差异有统计学意义(P均<0.05)。因此AE可通过下调cmyc和hTERT表达从而抑制HepG2细胞端粒酶活性。
除了上述研究之外,还有研究者发现芦荟大黄素能诱导肺癌细胞株CH27发生凋亡,用不同浓度的AE作用于肿瘤细胞,会发现剂量-时间依赖性的抑制关系,同时发现这种抑制作用在AE的浓度为50um时效果最显著。总之芦荟大黄素对肿瘤细胞的作用的研究还有很多,随着其抗肿瘤活性的研究深入,其各种抗癌机制也将逐渐被阐明,有助于芦荟大黄素类抗癌药物的研发。
[1]芦荟大黄素对人子宫内膜癌细胞HEC-1-B迁移及侵袭的影响[J].
[2]芦荟大黄素激活Notch信号通路影响子宫内膜癌细胞增殖、凋亡及对患者预后的意义[J].
[3]芦荟大黄素对人肝癌HepG2细胞端粒酶活性的影响及机制探讨[J].
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