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[药理知识] 浅析肺癌小鼠肿瘤的移植造模方法

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  • TA的每日心情

    2018-7-26 15:32
  • medicilon 发表于 2018-8-16 15:02:27 | 显示全部楼层 |阅读模式
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    人肺癌裸鼠肿瘤模型是抗肿瘤药研究常用的模型,利用裸鼠建立肿瘤模型,进行防治研究,是基础医学研究中的重要内容。保持肿瘤生物学特性的稳定,尽可能地模拟癌症患者临床生理特征是评价一个裸鼠异种移植瘤模型的成功的关键。肺癌小鼠肿瘤的移植造模方法有细胞培养、组织块移植和匀浆液移植三种,肿瘤的来源是取病人新鲜瘤组织,培养传代的细胞(细胞悬液)在实验动物体内接种筛选出的高移植率的肿瘤细胞组织。
    1、细胞培养移植造模
    一般取对数生长期的肿瘤细胞,细胞酶消化后,多用无菌pbs或是无血清培养基稀释成造模需要的细胞数目,按实验目的进行不同部位的注射。细胞悬液造模一般需要大量的肿瘤细胞,一般会在1×10~7 上下的细胞数量。
    2、组织块移植造模
    取培养细胞或是病人肺癌新鲜标本组织块造模成功的动物移植瘤,当肿瘤直径约1cm,脱颈处死实验动物,无菌剥离瘤体,去除瘤体外包膜,用医用生理盐水冲洗2-3次,取鱼肉样新鲜组织剪成直径约2mm均匀大小的瘤体组织块,用25号接种针接种于实验部位。人肺癌个体化传代组织块移植模型有望成为患者个体化治疗提供药物筛选,且研究发现多代接种有助于提高肿瘤移植的成功率。
    基于组织块法建立的移植瘤模型培养出的肿瘤组织不仅保留了亲代肿瘤的生物学特征、染色体特征和肿瘤标志物等,还保留了亲代肿瘤的组织结构特征,更大程度的模拟人体内环境。此模型可用于评价肿瘤药物的疗效、探索抗肿瘤药物的耐药机制、分析生物标志等。
    3、匀浆液移植造模
    取培养细胞造模成功的动物移植瘤,肿瘤体积约1立方厘米,脱颈处死实验动物,无菌剥离瘤体,去除瘤体外包膜,剪碎,加入生理盐水,用200 目铜网过滤,制备成单细胞悬液,台盼蓝染色计数活细胞调整实验需要用细胞数目,注射于实验部。
    细胞培养和匀浆液移植,通过细胞计数,接种基数可控,单从皮下接种来看,造模的瘤体生长更为均匀,但是匀浆液相对来说制备复杂,且在处理过程中容易产生死细胞,引起实验动物炎症反应造成继发感染等不良情况,而改良的组织块接种适于中药抗肿瘤筛选的实验模型。
    一般来说,裸鼠人类恶性肿瘤移植具有以下几个典型特点:
    (1)被移植肿瘤仍保持原有组织学构成或各种机能;
    (2)人癌组织的组织培养物移植种于裸鼠时,能重现已在组织培养中消失的原有癌结构,同时几乎很少能发现被移植肿瘤的转移。这些特征有助于分析肿瘤的性质。
    人体肿瘤移植于免疫缺陷动物,能保持其生物学特性,用于研究人体肿瘤对药物的敏感性有很大的帮助,因此裸鼠肿瘤模型的建立有助于改进诊断模式及探索新的治疗药物。美迪西可以根据客户的需求提供各种有效的原位移植模型,用来检测药物的有效性,常规的疾病模型有:乳腺癌、肺癌、结肠癌、胶质母细胞瘤、卵巢癌等,通过大小鼠、仓鼠等进行动物实验。
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